OBTENCION DEL PROTOCOLO EN LA MULTIPLICACION "IN VITRO" DE CIPRES (Cupressus macrocarpa) EN EL CIBREF - UTO

Tesis de Grado

Tesis de Grado
Tesis de Grado F. AGRONOMÍA (Licenciatura) Universidad Técnica de Oruro,

El Ciprés (Cupressus macrocarpa), es un árbol perenne perteneciente a la familia Cupresacea más común en el altiplano, originaria de la región de monterrey en la costa de California la especie es resistente a las heladas. Puede crecer tanto en suelos arenosos como también en suelos gredosos. El desarrollo de las investigaciones biotecnológicas ha demostrado que estas nuevas herramientas ofrecen oportunidades para elevar la producción agrícola y mejorar el nivel de vida. En la actualidad las técnicas del cultivo in vitro constituyen uno de los métodos biotecnológicos que ha aportado el desarrollo de una nueva agricultura. El objetivo del presente trabajo fue obtener un protocolo adecuado en la multiplicación in vitro de Ciprés (Cupressus macrocarpa). El trabajo se realizo en el centro de Investigación de Biotecnología y Recursos Fitogenéticos (CIBREF), dependiente de la Facultad de Ciencias Agrarias y Naturales (FCAN y UTO). El proceso de investigación de laboratorio tuvo las siguientes fases: En la fase 0 la selección del (Cupressus macrocarpa) se realizo en predios del vivero de la FCAN; las plantas seleccionadas son plantas madres o donantes de las cuales se recolectaron la semilla de los estróbilos. a) Determinación de la viabilidad de la semilla, b) Desinfección de la semilla y c) Porcentaje de germinación para el Ciprés en laboratorio (Agua caliente y agua fría). En la fase I se implantaron embriones y brotes cumpliendo con las normas de asepsia por lo que se tuvo un 50% de contaminación con una concentración hipoclorito 1% y el carbón activo (1g/L) durante 5 segundos, con el medio solido por un periodo de 2 semanas. En la fase II fase de multiplicación del material vegetal, después de las 2 semanas, las Viroplantas obtenidas, en la Fase I: Fase de establecimiento, se trasladaron a tubos de ensayo con un medio de cultivo adicionando el regulador de crecimiento BAP (Bencil amino purina) 250 ppm, en esta fase se utilizo tres medios de cultivo Murashige y Sckoog, Horgan Aitken y Gamborg. En esta etapa tuvo una duración de 30 días (durante ese tiempo se formaron brotes). En esta fase se realizaron tres repiques, se utilizo tres medios de cultivo líquido, el primer repique se realizo a los 30 días, fueron trasladados a sala de crecimiento por el lapso de 30 días, para su desarrollo y posterior segundo repique transcurrieron. A los 45 días después se realizo el tercer repique, durante ese tiempo los brotes alcanzaron un desarrollo adecuado. En la fase III fase de enraizamiento y elongación, esta fase los brotes obtenidos durante la etapa de multiplicación (fase II), se transfirieron a nuevos medios de cultivo, el estado liquido con diferentes reguladores de crecimiento (Auxinas AIA, ANA, IBA) formulados para esa fase utilizando como base al medio de Murashige y Sckoog los mismos fueron llevados nuevamente a la sala de crecimiento, por un lapso de cuatro semanas.

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